2.试管法
(1)标志试管:取小试管2支,分辨标记抗A、抗B。
(2)加尺度抗血清:分辨滴加抗A、抗B尺度血清各1滴于相应标志的试管中。
(3)加红细胞悬液:分辨滴加被检者5% 红细胞生理盐水悬液l滴于各试管中,混匀。
(4)离心:以1 000 r/min离心1 min。
(5)察看成果:取出试管,先观察上层液有无溶血现象,再将试管轻轻动摇使沉于管底的红细胞浮起,肉眼视察有无凝集及凝集强度。
①完整凝聚:上层液体清亮、无色,底部有红细胞凝块,
USB显微镜,管内情胞呈花边状,用手指轻弹试管,红细胞上升,随即成为均匀的悬液。
②凝集强度判断:标准同玻片法。如稍微凝集或不见凝集,必需将反应物倒于玻片上,再以低倍镜观察。
(6)判定血型结果:按表4-2、图4-3所列的标准判断。
(7)报告方法: 正定血型(试管法)X型。
(8)操作示看法图4-5。图4-5ABO血型鉴定正定型试管法操作示意图
【注意事项】
1.器材所用器材必需干燥干净、防止溶血;为避免交叉污染,试管、尖滴管均一次性应用。
2.试剂分型血清质量性能应符合及格试剂的请求。
3.标本被检红细胞标本新颖,无细菌污染。
4.标记玻片及试管均应严厉标记。
5.加尺度抗血清
6.红细胞悬液红细胞悬液浓渡过高或过低,抗原抗体比例不恰当,使反响不显明,轻易误判为阴性反应。
7.离心离心时光和速度应正确,以防止涌现假阳性和假阴性结果。
8.察看凝集
(1)玻片法定型时,转动玻片动作要轻。注意防止悬液干枯,以免将玻片边沿干枯引起的红细胞凝集误以为抗原抗体反响凝集。
(2)理论上IgM抗A和抗B与相应红细胞的反映温度以4℃Zui强,但为了防止冷凝聚现象的干扰,一般仍在室温(20°C~24°C)内进行实验,37°C可使反响削弱。
(3)玻片法反应时光不能少于10 min,否则较弱凝集不能呈现,造成假阴性。
(4)察看结果时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝集以及缗钱状形成的差别。明白溶血的产生提醒存在抗原抗体反映,意义同凝集。9.断定成果常见问题见表4-3。
10.报告结果 标记、操作、结果判断、结果记载与报告应严厉核对,避免笔误。
11.正反定型结果不一致的解决措施见反定型法。12.玻片法与试管法比拟见表4-4。
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