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脱落酸对气孔关闭的影响

 一、原理

  植物内源激素ABA(脱落酸)能使气孔关闭,降低叶片蒸腾速率,外源ABA也有同样的作用。可以用称量法、镜检法直接或间接地测量气孔开度,以检验外源ABA的作用,加深了解ABA的生理功能。

  二、仪器与用具

  显微镜1台(附接目测微尺);温箱1台;感量0.001g天平;25ml烧杯6只;10ml移液管3支;剪刀1把;尖头镊子1把;光源;载玻片和盖玻片等。

  三、试剂

  1. 100mg/L ABA:10μg ABA溶于100ml水中;

  2. 蒸馏水;无水乙醇;

  3. 10%醋酸纤维素丙酮溶液:称醋酸纤维素1g,加纯丙酮10ml溶解即可。

  四、方法

  1. ABA对小麦叶片气孔开度的影响

  (1)取样:选择照光培养,生长均匀,约10天苗龄的小麦,取第一麦叶为材料,剪取长10cm切段共60段。

  (2)设置处理:取6只25mL烧杯(直径尽量一致),分成三组,每组2只,按下表进行处理,即第一组每杯加蒸馏水10mL,第二组每杯加蒸馏水10ml和小麦叶片15段,第脱落酸对气孔关闭的影响

  三组每杯加10mg/L的ABA溶液10mL和小麦叶片15段,均将叶片切段的基部插在溶液中。

  (3)第一次称重:将上述各处理烧杯称重,记录原初重量。

  (4)第二次称重:将6只烧杯放在3000lx的光源下,照光2h后再称一次重量。

  (5)计算与比较:将两次称重结果分别填入表中,计算与比较三种处理的蒸发量,分析ABA对气孔开度和蒸腾的影响。

  表10-1 ABA对小麦叶片蒸腾作用影响的记载表

  注意事项:处理2与处理3各烧杯中插的麦叶切段尽可能一致。

  2. ABA对蚕豆叶片气孔开度的影响

  (1)取蚕豆倒2或倒3复叶的叶片2张,分别放入5ml蒸馏水(对照)和5ml 10mg/L ABA溶液中,每种处理设2个重复。

  (2)放在3000-4000lx灯光下照光2-3h。

  (3)观察(任选以下一种方法)。

  A. 活体观察:用带有接目测微尺的显微镜,观察气孔的开度,测量孔径大小。

  B. 剥表皮观察:用镊子撕下靠近中脉处的下表皮,立即放入无水乙醇中固定,然后放在载玻片上,盖上盖玻片在显微镜下观察测量各处理的气孔开度。

  C. 印迹法:用10%醋酸纤维丙酮溶液涂在叶子下表皮,待干后取下,置显微镜下测量。

  五、根据测量结果,分析ABA对气孔开度的影响


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