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　　 HE 染色技术兴起之后，通过光镜视察，很多组织的细胞构筑得到了充足的描写。这些描写有力地支撑了19 世纪中叶开端普及的细胞学说。然而奇异的是，HE 染色切片上神经组织的细胞构筑难以看明白，脑组织尤其如此。在镜下能视察到显明的蓝色细胞核，以及四周的斑块状或颗粒状核周质；但核四周被着染的物资逐渐减淡并融会到四周组织中，而不是像在其它大多数组织中那样局限在“细胞”的范畴内。HE 染色不能有效显示神经组织的细胞构造，给神经体系的研究带来必定艰苦，甚至使当时的学术界对细胞学说是否实用于神经体系发生了猜忌。

　　为了补充惯例染色技术的空缺，Nissl 染色、Weigert 髓鞘染色等办法纷纭问世，但都没能有效地显示出神经组织的细胞形态和构筑情势。与发现这些方式的学者同时期的意大利医师Golgi 成为了荣幸者。一次偶然的机遇，他发现重铬酸钾固定的神经组织可以被硝酸银染成棕玄色；拿到显微镜下察看发明，切片上呈现了很多棕玄色的结构，它们具有修长的崛起，形态各异，并似乎彼此接触。与其它染色法的成果进行对照发明，这些具有崛起的构造含有细胞核，可能正是构成神经组织的细胞。由于那个时期的认识局限，Golgi 本人仍然以为神经组织不是由细胞组成的，而是一个通联的原生质网络；然而他偶然发明的这一技术却成为了开启现代神经生物学大门的钥匙。

　　Golgi镀银染色的成果很快在欧洲传布开来。19 世纪末，当西班牙科学家Cajal看到Golgi 染色的切片后立即被其优美的图像所深深吸引，并在日记中留下了这样的文字（英译）：“What an unexpected sight! Sparse, smooth and thin black filaments or thorny, thick, triangular, stellate, or fusiform black cells could be seen

　　against a perfectly translucent yellow background! One might almost liken the images to Chinese ink drawings on transparent Japanese paper… this is the Golgi method”，读数显微镜报价。从此，Cajal 以极高的热忱开端利用Golgi 镀银法研讨神经组织。

　　首先，Cajal 改良了Golgi 染色法，使其更加稳固。改良后的Golgi 染色法请求神经组织在固定液中长时光浸泡，并用重铬酸钾或锇酸进行处置；然后将组织投进低浓度硝酸银中反映，天生棕色的铬银沉淀；染色后的组织用火棉胶或石蜡进行快速包埋，切成厚片，即可在显微镜下直接察看。这个方式已经成为镀银染色的经典技巧，今天仍在应用。但是铬银沉淀为什么会恰好天生在神经细胞上呢？为什么总是只有一小部分神经细胞随机着色呢？这两个问题一直困扰着人们，至今没有找到明白答案。

　　在经典Golgi 染色的基本上，Cajal 又发展了后来被人冠以他自己的名字的一套染色技巧，得到了更加丰盛的图像和主要的理论贡献。与Golgi 染色法不同，Cajal 染色法首先借助神经细胞的嗜银性，用硝酸银浸透全部组织，然后通过焦性没食子酸、对苯二酚或甲醛将细胞内的银离子还原为金属银颗粒，即可在显微镜下察看到深染的神经细胞。由于这个原理，Cajal 镀银染色法又叫做“还原银法”，也是一个今天仍应用的经典方式。有趣的是，神经细胞的嗜银性似与神经原纤维有关，由于经过Cajal 染色后，尽管低倍镜下看全部细胞都像充斥了棕玄色物资，但在高倍镜下显示的却是精致的神经原纤维构造。此外，Cajal法还可以显示切片上所有的细胞。借助这套办法，Cajal 及其同事细心研讨了成体以及胚胎时代神经组织的细胞构筑，提出了“神经元学说”、神经细胞的“极化定律”等理论；他们的结果构成了现代神经生物学的基本。1906 年，Golgi 与Cajal共同获得了诺贝尔医学与生理学奖。

　　在20 世纪上半叶，神经组织的镀银染色法又涌现了一些渺小的改良。比如，基于Golgi 与Cajal 染色的原理，一些衍生技术可以用于特异性地显示神经组织的胶质细胞。前苏联的杰尼卡染色法也以硝酸银为反映物，可在光学显微镜下显示突触的散布。Cox 等用汞盐取代银盐镀染神经细胞，同样获得了优美的图像，并且图像的背景更清洁，染色胜利率进一步进步。Nauta 等则应用高锰酸钾克制正常神经纤维着色，同样采取镀银法，却能显示出溃变的纤维。电子显微镜问世后，人们发现镀银染色的成果还可在电镜下视察。这些技术改进使科学家在神经束路追踪技术呈现之前，能够用惯例的办法研究神经体系各部位的细胞形态和纤维通联关系。因此到20 世纪50 年代呈现了“Golgi 法的复兴”，今天威望教科书上的大部分神经组织形态学知识就是在那个时候积聚起来的。

　　20 世纪下半叶开端，随着神经束路追踪、免疫组织化学和分子生物学检测等技术的兴起，镀银染色这类经典形态学技术逐渐被大多数人遗忘。然而，不论是生物医学教学还是科学研讨中，镀银染色技巧以其在利用范畴、图像精致水平和标本保留性等方面的上风，仍然具有不可替换的位置。


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