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[专题]显微镜的使用方法及注意事项

根据显微镜类型区分:

>>倒置显微镜的使用方法和维护事项   >>生物显微镜的操作使用及注意事项  >>延长金相显微镜使用寿命10点注意事项

显微镜通用使用方法: 

一 显微镜的构造及各部名称
二 显微镜的使用
  >>2.1 对光
  >>2.2 接物镜的使用及光线的调节
  >>2.3 低倍、高倍、油镜头的识别
  >>2.4 低倍镜换高倍镜的使用方法
  >>2.5 油镜的使用方法
  >>2.6 低倍镜的使用方法
  >>2.7 高倍镜的使用方法
  >>2.8 使用注意事项
三 显微镜的保养


(一)  显微镜的构造及各部名称

    关于显微镜的结构与使用方法已于生物学和组织胚胎学课程中学过,在寄生虫学的学习中,要求进一步熟练使用。显微镜的构造及各部名称见图1。

显微镜的构造及各部名称

(二)  显微镜的使用

利用自然光源镜检时,Zui好用朝北的光源,不宜3采用直射阳光;利用人工光源时,宜用日光灯的光源。   

镜检时身体要正对实习台,采取端正的姿态,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。   

镜检时载物台不可倾斜,因为当在五套载物台倾斜时,液体或油易流出,既损坏了标本,又污染载物台,也影响检查结果。   

显微镜的构造及各部名称
显微镜的构造及各部名称

镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复。   

显微镜的重光为对光,接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本时,光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等,均为自然光状态的物体,有大有小,色泽有深有浅,有的无色透明,而低倍、高倍接物镜转换较多,故须随着镜检时对不同标本和要求,需要随时调节焦距和光线,这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强。   

1. 对光:   

(1)将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。

(2)拨动反光镜,调节至视野Zui亮无阴影。反光镜有平、凹两面,光源强时用平面,较暗时用凹面,需要强光时,将聚光器提高,光圈放大;需要弱光时,将聚光器降低,或光圈适当缩小。   

(3)将待观察的标本置载物台上,转动粗调节器使镜筒下降至接物镜接近标本。于转动粗调节器的同时,须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本之间的距离。   

(4)左眼于接目镜观察,同时左手转动粗调节,使镜筒徐徐上升以调节焦距,使视野内的物象看到上时即停,再调微调节器,至标本清晰为止。   

2. 接物镜的使用及光线的调节:   

显微镜一般具有三个接物镜,即低倍、高倍及油镜,固定于接物镜转换盘孔中。观察标本时,先使用低倍接物镜,此时,视野较大,标本较易查出,但放大倍数较小(一般放大100倍),较小的物体不易观察其结构。高倍接物镜放大的倍数较大(一般放大400倍),能观察微小的物体或结构。   寄生虫的蠕虫卵,微丝蚴,原虫的滋养体及包囊,昆虫的幼虫,均使用低、高倍镜。组织细胞内的原虫,则使用油镜。使用低、高倍镜观察,如在低倍镜下不能准确鉴定所见的物体或其内部构造时,则转高倍镜观察。使用油镜观察,一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。   

3. 低倍、高倍、油镜头的识别:   

(1)标明放大倍数10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.30。   

(2)低倍镜Zui短,高倍镜较长,油镜Zui长。   

(3)镜头前面的镜孔低倍镜Zui大,高倍镜较大,油镜Zui小。   

(4)油镜头上常刻有黑色环圈,或“油”字。   

4. 低倍镜换高倍镜的使用方法:   

(1)光线对好后,移动推进器寻找需要观察的标本。   

(2)如标本的体积较大,不能清楚查见其构造因而不能确认时,则将标本移至视野中央,再旋转高倍接物镜于镜筒下方。   

(3)旋转微调节器至物象清晰为止。   

(4)调节聚光器及光圈,使视野内的物象达到Zui清晰的程度。   

5. 油镜的使用方法:   

(1)原理:使用油镜观察时,需加香柏油,因为油镜需要进入镜头的光线多,但油镜的透气孔Zui小,这样进入的光线就少,物体不易看清楚。同时又因自玻片透过的光线,由于介质(玻片-空气-接物镜)密度(玻片:n=1.52,空气:n=1.0)不同而发生了折射散光,因此射入镜头的光线就更少,物体更看不清楚。于是采用一种和玻片折光率相接近的介质如香柏油,加于标本与玻片之间,使光线不通过空气,这样射入镜头的光线就较多,物象就看得清楚(图2)。   


低倍镜换高倍镜的使用方法

2 显微镜油镜头原理



(2)油镜的使用:   

a.将光线调至Zui强程度(聚光器提高,光圈全部开放)。   

b.转动粗调节器使镜筒上升,滴香柏油1小滴(不要过多,不要涂开)于接物镜正下方标本上。   

c.转动接物镜转换盘,使油镜头于镜筒下方。   

d.俯身镜旁侧面在肉眼的观察下,转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内,轻轻接触玻片为止。   

e.慢慢转动粗调节器,使油镜头徐徐上升至见到标本的物象为止。   

f.转动微调节器,使视野物象达到Zui清晰的程度。   

g.左手徐徐移动推进器,并转动微调节器以观察标本。   

h.标本观察完毕后,转动粗调节器将镜筒升起,取下标本玻片。立即用擦镜纸将镜头上的香柏油擦净。   

低倍镜的使用方法

(1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边7厘米为宜,便于操作。  
 
(2)对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。调节为较大光圈并将反光镜转向光源,左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜偏转角度,直到视野内出现明亮光斑为止。   

(3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用压片夹夹住,然后移动玻片,将所要观察的部位调到视野范围内。   

(4)调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢地下降至物镜距标本片约5毫米处,应注意在下降镜筒时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜筒下降,以免下降过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。   如果物象不在视野中心,可移动玻片,将所要观察的部位调到视野范围内。(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适,可通过调整光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台。

高倍镜的使用方法

(1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到Zui清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。   

(2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。   

(3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5-1圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)   如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。   想让像变大就要使物镜靠近物体,目镜远离物镜一些,像变小则反之。

6. 显微镜的使用注意事项 


使用显微镜之前,应熟悉显微镜的各部名称及使用方法,特别应掌握识别三种接物镜之特征。
■寄生虫学实习中所观察的标本,大多数为无色和颜色较浅,因此必须注意光线的调节。
■新鲜标本观察时,须加盖玻片,以免标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜,同时可使标本表面匀平,光线得以集中,有利于观察。
■持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势,不可单手提取,以免零件脱落或碰撞到其它地方。   
■轻拿轻放,不可把显微镜放置在实验台的边缘,应放在距边缘10cm处,以免碰翻落地。   
■保持显微镜的清洁,光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,机械部分用布擦拭。   
■水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即用擦镜纸擦净。   
■放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。   
■要养成两眼同时睁开观察的习惯,以左眼观察视野,右眼用以绘图。   
■不要随意取下目镜,以防止尘土落入物镜,也不要任意拆卸各种零件,以防损坏。   
■使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内,其步骤是:取下标本片,转动旋转器使镜头离开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集光器(但不要接触反光镜)、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内。Zui后填写使用登记表。(注:反光镜通常应垂直放,但有时因集光器没提至应有高度,镜台下降时会碰坏光圈,所以这里改为平放)

(三) 显微镜的保养   

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图3 加用盖玻片后,标本表面匀平,光线得以集中,便于检查示意图  
显微镜物镜与载玻片

1.显微镜在从木箱中取出或装箱时,右手紧握镜臂,左手稳托镜座,轻轻取出。不要只用一只手提取,以防显微镜坠落,然后轻轻放在实习台上或装 入木箱内。   

2.显微镜放到实习台上时,先放镜座的一端,再将镜座全部放稳,切不可使镜座全面同时与台面接触,这样震动过大,透镜和微调节器的装置易损坏。   

3.显微镜须经常保持清洁,勿使油污和灰尘附着。如透镜部分不洁时,用擦镜纸轻擦,如有油污,先将擦镜纸蘸少许二甲苯拭去。   

4.显微镜不能在阳光下暴晒和使用。   

5.接目镜和接物镜不要随便抽出和卸下必须抽取接目镜时,须将镜筒上口净用布遮盖,避免灰尘落入镜筒内。更换接物镜时,卸下后应倒置在清洁的台面下,并随即装入木箱的置放接物镜的管内。   

6.显微镜用完后,取下标本片,经聚光器降下,再将物镜转成“八”字形,转动粗调节器使镜筒下降,以免接物镜与聚光器相碰。   

7.显微镜应放在干燥的地方,以防生霉。


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