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植物组织培养的实验室条件

https://www.optical17.com 来源:原创 日期:2010-12-28 15:47:31
  (一)基础实验室

  根本实验室包含筹备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、造就室、缓冲间,是组织培育实验所必需具备的基础条件。如进行工厂化生产,年产4万-20万,需3-4间实验用房,总面积60平方米。

  1、准备室(化学实验室)

  功效:又求乞学实验室,进行一切与实验有关的筹备工作:完成所应用的各种药品的储备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、造就基和培育器皿的灭菌、造就资料的预处置等。

  要求:Zui好有20平方米左右。请求宽阔明亮、以便于放置多个实验台和相干装备,便利多人同时工作;同时要求透风条件好,便于气体交流;实验室地面应便于干净,并应进行防滑处置。

  分类:

  分体式-研讨性质实验室,离开的若干房间将预备室分解为药品贮躲室、培养基配制与洗涤室和灭菌室等,功效明白,便于治理,但不适于大范围生产。

  通间式-规模化实验室,预备室一般设计成大的通间,使实验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。准备实验的进程在同一空间进行,便于程序化操作与治理,实验中减少各环节间的连接时光,从而进步工作效力。此外还便于培养基配制、分装和灭菌的主动化操作程序设计,从而减少范围化生产的人工劳动,更便于无菌条件的节制和尺度化操作系统的树立。

  设备:准备室应具备实验台、药品柜、水池、仪器、药品、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。

  2、洗涤灭菌室

  功效:完成各种用具的洗涤、干燥、保留、培育基的灭菌等。

  要求:洗涤灭菌室依据工作量的大小决议其大小,一般面积把持在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中心实验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。假如工作量大,可以购买一台洗瓶机。筹备1-2个洗液缸,专门用于洗涤对干净度请求很高的玻璃器皿,地面应耐湿并排水良好。

  设备:水池、落水架、中心实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器(如烘箱)等。

  3、无菌操作室(接种室)

  功能:也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技巧程序,是植物离体培养研究或生产中Zui要害的一步。

  要求:接种室宜小不宜大,一般7~8平米(10-20平米)即可,其范围根据实验需要和环境节制的难易水平而定。要求封闭性好,干爽宁静,清洁明亮,能较长时间保持无菌,因此不易设在轻易受潮的处所;地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒;配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动;为便于消毒处理,地面及内墙壁都应采用防水和耐腐化材料;为了保持清洁,无菌室应防止空气对流。接种室要求在恰当地位吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。Zui好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,蔡司镜片,减少与外界空气对流。

  一般新建实验室的无菌室在应用之前应进行灭菌处理,处理方式是甲醛和高锰酸钾熏蒸,并需定期灭菌处置,还可用紫外线照耀1-2h/周,或每次应用前照耀10-30min。

  装备:紫外灯、空调、解剖镜、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针),试验台、和搁架,还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品等。

  4、培养室

  功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体资料进行节制条件下的培养,无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场合。要求:约需10-20平方米左右,培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他从属设备而定,其设计以充足应用空间和节俭能源为原则。基础要求是能够掌握光照和温度,并保持相对的无菌环境,因此,培养室应保持清洁和适度干燥;为满足植物培养材料生长对气体的需要,还应安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置;为节俭能源和空间,应配置合适的培养架,并安装日光灯照明。

  研讨用实验室,通常可根据光照时光设置成永日照、中日照、短日照培养室,也可以依据温度设置成高平和低温培养室,每一个培养室的空间不宜过大,便于对条件的均匀把持。进行精致培养类型如细胞培养和原生质体培养,可采取光照培养箱或人工气象箱取代培养室。

  为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应该留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调掌握,光照由日光灯掌握。天花板和内墙Zui好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖展设,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。培养室外应有一准备间或走廊。

  培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成,一般设5层,Zui低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm左右,培养架即高1.7m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计,如采取40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽度一般为60cm。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,间隔在20cm,光照强度为2000-3000lx。

  培养室Zui主要的因子是温度,一般坚持在20?27℃左右,具备产热装置,并安装窗式或立式空调机。由于热带植物和冷带植物等不同种类要求不同温度,Zui好不同种类有不同的培养室。

  室内湿度也要求恒定,相对湿度以坚持在70%~80%为好,可安装加湿器。把持光照时光可安装定时开关钟,一般需要天天光照10-16h,也有的须要持续照明。短日照植物须要短日照条件,永日照植物需要永日照条件。现代组培实验室大多设计为采取自然太阳光照作为重要能源,这样不但可以节俭能源,而且组培苗接收太阳光生长良好,驯化易成活。在阴雨天可用灯光作弥补。

  设备:培养架(控温控光控湿)、摇床、转床、主动控时器、紫外灯、光照培养箱或人工气象箱、生化培养箱、边台实验台用于拍摄培养物生长状态,除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。

  5、缓冲间

  功能:是进进无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带进的尘埃等污染物。工作职员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才干进进无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。

  要求:缓冲间需3-5平方米,可建在预备室外或无菌操作室外,应坚持干净无菌;备有鞋架和衣帽挂钩,并有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的工作服;墙中用1-2盏紫外灯定时照射,对衣物进行灭菌。缓冲间Zui好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照耀灭菌。缓冲间的门应当与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。

  设备:1-2盏紫外灯、水槽、实验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩。

  (二)帮助实验室

  依据研讨或生产的须要而配套设置的专门试验室,重要用于细胞学察看和生理生化剖析等。

  1、细胞学实验室

  功能:用于对培养物的察看剖析与培养物的计数,对培养资料进行细胞学鉴定和研究,由制片室和显微视察室组成。制片是获取显微视察数据的基本,配备有切片机、磨刀机、温箱及样品处理和切片染色的设备。应有透风柜和废液处理设施。显微察看室重要是显微镜和图像拍摄、处理设备。

  请求:明亮、干净、干燥、防止湿润和灰尘污染。

  装备:双筒实体显微镜、显微镜、颠倒显微镜等。

  2、生化剖析试验室

  功能:培养细胞产物为主要目标的实验室,应树立相应的分析化验实验室,随时对培养物成分进行取样检讨。大型次生代谢物生产,还需有效分别实验室。


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