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小抄

https://www.optical17.com 来源:原创 日期:2010-12-20 9:34:56
  简答

  1. 光学显微镜的结构组成:根本结构包括光学系统和机械系统两大部分。光学系统是显微镜的主体部分,包括物镜目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明装置。机械系统是为了保证光学系统的成像而配置的,包括调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支撑部件。照明设置的主要部件有光源、滤光器、聚光镜和玻片等。

  2. 电阻抗血细胞分析技术的运用及缺陷:利用:电阻抗原理可进行白细胞计数和分群、血小板计数、红细胞计数、红细胞均匀体积和血小板均匀体积测定及获得其他相干参数等。毛病:①白细胞分类计数不特异;②技巧所限,影像红细胞有关参数的正确性;③血小板计数的干扰因素多;④不易发明异常细胞。

  3. 电阻抗(库尔特)血细胞检测原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值大于稀释溶液的电阻值;当血细胞通过检测器的孔径感受区时,检测器内外电极之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号;脉冲信号数即是通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞大小成正比。

  4. 血凝仪常用检测原理:①凝固法:通过检测血浆在凝血激活剂作用下一系列物理量(光、电、超声、机械活动等)的变化,再由盘算机分析所得到数据并将之换算成终极成果,故也称为生物物理法。按丈量原理可分为电流法、超声分析法、光学法和磁珠法四种。②底物显色法:通过测定产色底物的吸光度变更来推测所测物质的含量和活性,故也称为生物化学法。③免疫学办法:以纯化的被检物资为抗原,制备相应的抗体,然后应用抗原抗体反映对被检物进行定性或定量测定。试验室使用的方式有:免疫扩散法、火箭电泳法、双向免疫电泳法、酶标法、免疫比浊法。血凝仪使用免疫比浊法。

  5. 尿液分析仪的检测原理:把试剂带浸进尿液中后,除了空缺块外,其余的试剂块都因和尿液产生了化学反映而产生了颜色的变更。试剂块的色彩深浅与光的接收和反射水平有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,接收光量值越大,发射光量值越小,反射率也越小。反之,反射率越大。即色彩的深浅与光的反射率成比例关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系。所以只要测得光的反射率既可以求得尿液中各种成分的浓度。

  6. 酶标仪的性能评价指标:酶标仪的性能评价指标有滤光片波长精度检讨及其峰值测定、敏锐度和正确度、通道差与孔间差检测、零点漂移、精密度评价、线性测定、双波长评价等。

  7. 电化学反对数放大器的作用:电解质分析仪,测无机离子及血气剖析中测二氧化碳,在信号处置中,应用反对数放大器,原因是,其电极测定的是电位差,而依据Nernst方程电位差与离子的活度(浓度)的对数值成线性,故求离子活度时,要通过反对数放大器将点位差取反对数。

  8. 临床检验仪器分类:通常以临床检验的办法为主对临床检验仪器进行分类,或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。

  9. 临床检验仪器常用的性能指标:一个精良的检验仪器应具有的性能指标有:敏锐度好、精度高、噪音小、误差小、辨别率高、可靠性、反复性好、响应敏捷、线性范畴宽和稳固性好。

  10. 光学显微镜工作原理:显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像体系,应用光学原理,把人眼所不能辨别的渺小的物体放大成像,供人们提取物资微细构造信息的光学仪器。把焦距较短、靠近视察物、成实像的透镜组成为物镜,而焦距较长,靠近眼镜、成虚像的透镜组成为目镜。被察看物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到Zui大放大后果的倒立的虚像,位于人眼的明视间隔处。

  11. 光学显微镜的性能参数有哪些,这些参数间的影响和制约关系如何:显微镜的性能参数重要有放大率、数值孔径、分辩率、视场、景深与焦长、镜像亮度、镜像清楚度、工作间隔和机械筒长。显微镜的数值孔径与其放大率成正比,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像亮度成正比。因此,应用较大数值孔径的物镜,其放大率和辨别本事较高,但视场、景深、工作间隔较小。

  13. 扫描电镜与透射电镜相比有哪些特色:①能够直接视察你样品表面的结构,样品的尺寸可大至120mm*80mm*50mm;②样品制备过程简略,不用切成薄片;③样品可以在样品室中作三度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对样品进行察看;④景深大,图像富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜大几十倍;⑤图像的放大规模广,分辩率也比拟高。可放大十几倍到几十万倍,它基础上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范畴,分辩率介于光学显微镜与透射电镜之间,可达3nm;⑥电子束对样品的损伤与污染水平较小;⑦在察看形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。

  14. 光学显微镜与电子显微镜的主要差别:①照明源不同②透镜不同③成像原理不同④所用标本制备方法不同。

  15. 离心机的工作原理:离心是利用旋转活动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差别进行分别、浓缩和提纯生物样品的一种办法。悬浮液在高速旋转下,由于宏大的离心力作用,使悬浮的渺小颗粒以必定的速度沉降,从而使溶液得以分别。颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的粘度有关。离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强盛的离心力,迫使液体中微粒战胜扩散加快沉降速度,把样品中就有不同沉降系数和浮力密度的物质分分开。

  16. 常用的离心方式:平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法。

  17. 什么是速率区带离心法:速率区带离心方式是依据分离的粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度层内形成几条离开的样品区带,到达彼此分别的目标。

  18. 什么是等密度区带离心法:当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的地位上(即等密度点)形成区带,称为等密度区带离心法。

  19. 离心机主要技术参数:Zui大转数:离心转头可到达的Zui大转速,单位是rpm。Zui大离心力:离心机可产生的Zui大相对离心力场RCF,单位是g。Zui大容量:离心机一次可分离样品的Zui大体积,通常表现为m*n,m为一次可容纳的Zui多离心管数,n为一个离心管课容纳分离样品的Zui大体积,单位是ml。调速规模:离心机砖头转速可调剂的范围。温度把持规模:离心机工作时可节制的样品温度范畴。工作电压:一般指离心机电极工作所需的电压。电源功率:通常指离心机电机的额定功率。

  20. 离心转头常用标志:FA固定角转头 V垂直转头 SW甩平式转头 CF持续流动转头 Z区带转头 Ti钛或钛合金制成

  21. 在电解分析仪中,如何进行电极系统的颐养:电极系统的颐养重要包含钠电极、钾电极、氯电极和参比电极的保养。保持逐日用厂家供给的干净液和钠电极调剂液进行清洗和调剂时Zui基础的颐养。钾电极为选择性膜电极,应用过程中会吸附蛋白质,影响电极的响应敏锐度。每月至少调换一次内充液。氯电极为选择性膜电极,使用进程中亦会吸附蛋白质,Zui好用物理法进行膜电极的干净。每周均须要检讨参比电极内是否足够的饱和氯化钾溶液及氯化钾残片。一般三个月要换一次参比电极膜。

  22. 简述血气分析仪的基础结构及工作原理:血气分析仪的根本构造可分为电极、管路和电路三大部分,其工作原理:被测血液样品在管路系统的抽吸下,进入样品室内的测量毛细管中。丈量毛细管的管壁上开有四个孔,孔内分辨插有PH、PCO2和PO2三支测量电极和一支参比电极。其中,PH和PH参比电极共同组成对PH值的测量系统。血液样品进进样品室的测量管后,管路系统结束抽吸,样品同时被四个电极所感测,。电极发生对应于PH、PCO2和PO2三项参数的电信号,这些电信号分辨经放大、模数转换后送到微处理机。经微处置机系统处理、预算后,再分离送到各自的显示单元显示或打印机打印出测量成果。测量系统的所有部件包含温度把持、管道系统的动作等均由微机或盘算机芯片节制。

  23. 在血气分析仪中,如何对PH电机进行保养:PH电极的保养方法是:假如PH电极在空气中裸露2h以上,应将其放在缓冲液中浸泡6h~24h才干使用。血液中的蛋白质轻易粘附在电极表面,必需经常按血液→缓冲液(或生理盐水)→水→空气的次序进行清洗。亦可用随机附送的含蛋白水解酶的清洗液或自配的0.1%胃蛋白酶盐酸溶液浸泡30分钟以上,用生理缓冲液洗净后浸泡备用。若清洗后仍不能正常工作,应调换电极。

  24. 主动化血培养检测和剖析系统按检测原理可分为哪几类以及各类型的工作原理:以检测培养基导电性和电压为基本的血培育系统:血造就基中因含有不同电解质而具有必定导电性。微生物在生长代谢的过程中可发生质子、电子和各种带电荷的原子团,通过电极检测造就基的导电性或电压可判定有无微生物生长;利用测压原理的血培养系统:很多细菌生长进程中,常伴有接收或产赌气体现象,因此可应用培育瓶内压力的转变检测微生物的生长情形;采取光电原理监测的血培养体系:微生物在代谢过程中产生的CO2引起造就基pH值及氧化还原电位转变。利用光电比色检测血培养瓶中某些代谢产物量的转变,可断定有无微生物生长。

  25. 采取光电原理监测的血培育系统,按检测手腕可分为哪几类:可分成BioArgos系统、BacT/Alert系统、Bactec9000系列和Vital体系等四类。

  26. 简述流式细胞仪生物学颗粒分析原理:经特异荧光染料染色后的样品沿流动室的轴心向下贱动,流动室轴心至外壁的鞘液也向下贱动,形成包绕细胞悬液的鞘液流,鞘液和样品流在喷嘴邻近组成一个圆柱流束,与程度方向的激光束垂直相交。染色的细胞受激光照耀后发出荧光,这些信号分辨被光电倍增管接受,经过计算机储存、盘算、分析这些数字化信息,就可得到细胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性质等物理和生化指标。

  27. 简述流式细胞仪细胞分选原理:当某类细胞的特征与要分选的细胞雷同时,流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴充以特定的电荷,带有电荷的液滴向着落入偏转板间的静电场时,依所带电荷的不同分离向左偏转或向右偏转,落入指定的收集器内,不带电的液滴不产生偏转,垂直落入废液槽中被排出,从而到达细胞分类收集的目标。

  28. 流式细胞仪所检测的信号有哪些?这些信号所代表的意义和作用是什么:流式细胞仪所检测的信号有散射光和荧光信号。散射光信号:散射光分为前向角散射和侧向角散射,两个参数组合,可区分经裂解红细胞处置后外周血白细胞中淋巴细胞、单核细胞和粒细胞三个细胞群体,或在未惊醒裂解红细胞处理的全血样品找出血小板和红细胞等细胞群体。荧光信号:一种是细胞自身在激光照耀下发出微弱的荧光信号,另一种是经过特异荧光素标志细胞后,受激发照射得到的荧光信号,通过对这类荧光信号的检测和定量分析能懂得所研讨细胞的存在和定量。

  29. 结合检测型BCA在白细胞分类上主要有哪些技术:①电容、电导、光散射结合检测技术②电阻抗、射频与细胞化学结合检测技术③多角度激光散射、电阻抗联合检测技术④光散射与细胞化学检测技术。

  30. 简述双磁路磁珠法的测定原理:属磁电检测原理。在测试杯的两侧各有一组驱动线圈,它们产生恒定的交替电磁场,使测试杯内特制的往磁小钢珠坚持等振幅振荡运动;凝血酶激活剂参加后,随着纤维蛋白的增多,小钢珠的运动振幅逐渐削弱;另一组丈量线圈感应到小钢珠运动变化;仪器将活动幅度衰减到50%时断定为凝固终点。

  31. 简述试剂带构造:采取多层膜结构,第一层尼龙膜起到维护作用,防止大分子物质对反响的污染;二层绒制层,包含碘酸盐层的试剂层, 碘酸盐层可损坏维生素C等干扰物质,测量显微镜,试剂层含有试剂成分,重要与尿液中所测定物资产生化学反映,发生色彩变更;第三层是固定有试剂的吸水层,可使尿液均匀快速地浸进,并能克制尿液流到相邻反响区;Zui后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支撑体。

  32. 尿沉渣分析仪的几大类型:迄今为止尿沉渣剖析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析,得出相应的技巧材料与试验成果;另一类是流式细胞术分析。

  33. 简述流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理:测定是利用流式细胞术的电阻抗原理进行的。当一个尿标本被稀释并经染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。反响样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包抄,使每个细胞以单个纵列的情势通过流动池的中心轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光光束照耀。每个细胞有不同水平的荧光强度、前向散射光强度和电阻抗的大小。仪器将这种荧光,散射光等光信号改变成电信号,并对各种信号进行分析,Zui后得到每个尿液标本产生出的直方图和散射图。通过火析这些图形,即可区分每个细胞并得出有关细胞的形态。

  34. PCR分类:普通PCR扩增仪和实时荧光定量PCR扩增仪,其中普通PCR扩增仪包括普通定性PCR扩增仪、梯度PCR仪、原位PCR仪,普通定性PCR扩增仪又分为水浴式PCR仪、变温金属块式PCR仪、变温气流式PCR仪。实时荧光定量PCR扩增仪包括金属板式实时定量PCR仪、离心式实时定量PCR仪、各孔独立控温的定量PCR仪

  35. 什么是聚合酶链(PCR)技术:PCR技巧的实质是核酸扩增技术,通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和适合的PH缓冲液存在条件下延长引物,反复上述“变性→退火→引物→延长”进程至25-40个循环,呈指数级扩展待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目标核酸进行大批复制。

  计算题公式

  离心力 FC=mω2r=m(2πN/60)2r=(4π2N2rm)/3600 ω是旋转角速度,N是每分钟转头旋转次数,r是离心半径,m是质量。相对离心力:RCF=FC/mg 沉降系数:(dx/dt)/ω2r 离心场力: rω2


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